身后捐献眼球（角膜）的程序

㈠ 由志愿者生前填写志愿书，并有家属签名（或委托代理人签名），交眼库保管。 

㈡ 眼库将初步了解志愿者是否适合捐献眼球。 

㈢ 眼库向志愿者颁发荣誉证书。 

㈣ 志愿者临终前或刚去世后，由所在医院或家属（代理人）通知眼库。 

㈤ 死者的亲属（配偶、子女、父母、兄弟姐妹、监护人或律师）可以代表死者作出是否捐献眼角膜的决定，同时眼库有两位工作人员作为当事人在场签字即可。 

㈥ 眼库进一步了解志愿者的各项医学资料，以最后决定是否可作为角膜移植捐献者。 

㈦ 眼库通知医院暂时妥善保存尸体，如放入冰室内，闭合眼睑，结膜囊涂眼膏等。 

㈧ 眼库工作人员到现场（医院或家中）。 

㈨ 眼库复印死亡证及相关医学资料。 

㈩ 获取眼球（角膜）的工作。 

（十一）善后工作。 
 

供体的获取 

㈠ 获取前的准备： 

1． 在眼库内的工作： 

⑴ 电话了解捐献者情况，初步排除禁忌症； 

⑵ 准备手术器械包（眼球摘除包或角膜切除包）； 

⑶ 准备抽血用具、试管、填好化验单； 

⑷ 准备有关的表格文件，如现场记录表、捐献卡、荣誉证书等； 

⑸ 准备捐献礼品等； 

⑹ 眼库工作人员1～2人（视情况而定）； 

⑺ 备车，详细了解交通线路。 

2． 在现场（医院或家里）： 

⑴ 看死亡证明及有关病历，并复印； 

⑵ 如未办捐献手续，则现场办理； 

⑶ 初步检查尸体情况； 

⑷ 颈静脉处抽血6～8ml(HIV-I、II，乙肝，丙肝，梅毒，血常规，血型)； 

⑸ 最好请亲属回避； 

⑹ 准备照明用具。 

㈡ 全眼球摘除： 

1．器械及药品准备： 

⑴ 眼球摘除包：   

内含：孔巾一张，治疗巾一张，开睑器一个，斜视勾一把，眼科剪一把，视神经剪一把，有齿无齿镊各一把，血管钳一把，弯盘一个，纱布、棉球、棉签若干，义眼片二个，盛眼球杯二个。 

⑵ 有关药品：5%碘氟、生理盐水、1：5000新洁尔灭、庆大霉素注射剂。 

⑶ 一次性手套、口罩、帽子、手术衣、冰壶（内有冰块）等。 

2．眼球摘除程序： 

⑴ 5%碘氟消毒外眼皮肤二次（其范围按眼科手术要求）； 

⑵ 生理盐水和新洁尔灭冲洗眼结膜囊各一次； 

⑶ 开睑器开睑； 

⑷ 沿角膜缘剪开球结膜并向后分离； 

⑸ 勾出内直肌（或外直肌），血管钳夹住止端，然后剪断； 

⑹ 用视神经剪剪断视神经，拉出眼球剪断各条肌肉； 

⑺ 用1：1000庆大霉素冲洗眼球二次； 

⑻ 将眼球放入眼杯，角膜向上（眼杯底部置生理盐水庆大霉素湿纱布）； 

⑼ 胶布封盖，用记号笔写上眼别，放入冰壶内。 

3．摘眼后处理： 

⑴ 用棉球填塞眶腔； 

⑵ 装入义眼片； 

⑶ 整复上下眼睑至睑裂微闭状态。 

㈢ 原位角膜切除： 

1．器械准备： 

⑴ 器械包：孔巾、治疗巾、开睑器、小园刀片、角膜剪、角膜镊、透明义眼片； 

⑵ 药品：同眼球摘除，保存液（Optisol或其它保存液）； 

⑶ 其它同眼球摘除。 

2．操作程序： 

⑴ 皮肤消毒程序同眼球摘除； 

⑵ 结膜囊杀菌：1%碘氟浸泡3分钟，或者1：1000庆大霉素冲洗二次； 

⑶ 开睑器开睑； 

⑷ 沿角膜缘剪开球结膜； 

⑸ 用刀片自角膜缘向后轻刮，将筋膜组织刮向后； 

⑹ 角膜缘后2～3mm处切开巩膜，直达色素膜，但不能有眼内容脱出； 

⑺ 用角膜剪伸进切口，360°剪开； 

⑻ 用角膜镊提起巩膜缘，将色素膜轻轻分开； 

⑼ 将角膜片（含2～3mm宽巩膜）放入Optisol液（或其它保存液）； 

⑽ 角膜片内皮向上； 

⑾ 旋紧盖子，记号笔标出眼别，放入冰壶内。 

3．术后处理： 

置塑料透明角膜于眼表创面，调好位置，闭合眼睑。 

4．短时储存与运输： 

⑴ 冰壶（内有冰块）内储存； 

⑵ 冰水不能进入眼杯内； 

⑶ 运送途中始终保持角膜向上； 

⑷ 尽快送回眼库。

角膜组织操作流程及出入库管理规定

角膜组织入出库程序

入库

供体的筛选   

供体选择医学标准的建立

自从角膜移植手术开展以来，高质量的供体角膜对于穿透性角膜移植术的成败为人们所理解。然而，  眼库供体组织的质量管理是一个比较现代化的概念，尽管人们公认选择供体组织的主要责任在于手术医师， 但手术医师在很大程度上必须依靠眼库所提供的供体自身的资料，因此， 眼库管理的重要性进一步被人们所认识。

（一）供体的年龄

供体年龄的上限最佳选择为50岁以内的供体角膜，田此目前公认最佳的选择应为3—50岁的供体，且应考虑临床供、受体年龄的相互配对应用。但在实际的临床应用中，也是根据实际情况灵活运用。

我国由于供体的匮乏，在供体年龄的选择上作不到那么严格，但基本原则是用于角膜严重感染或外伤的治疗性角膜移植时，为挽救眼球和恢复部分视功能，年龄的下限应用到1岁以上胎儿角膜，年龄的上限应用到70岁左右。

对于角膜板层移植，供体年龄没有严格的选择。一般不必应用异种角膜作为供体， 以增加术后的成功率。

 (二)供体眼球采集的医学参考标准

为保证供体眼球的质量和保护受体的安全性，眼库技术人员在对供体眼球采集时，必须遵循一个相对的医学标准。技术人员在采集前必须仔细阅读供体生前有关健康资料，与医师谈话、询问家庭成员等， 以获得供体的真正死因。因此，我们对供体眼球的采集首先提出一个医学参考标准。如果供体具体存在下列已知情况，眼库不应该提供角膜用于手术。

穿透角膜移植、板层移植及其它眼组织移植的禁忌证：

凡具有下列情况的供体眼球不能应用于临床移植。

1、死亡原因不明。

2、死于未明确诊断的神经病。

3、Creutzfeldt-jacob(C—J)病。

4、亚急性硬化性全脑炎(SSPE)。

5、进行性多灶性白质脑病(PMLE)。

6、先天性风疹。

7、Reyes综合怔。

8、活动性病毒性脑炎、原因不明性脑炎和进行性脑病

9、败血症(细菌血症、真菌血症及病毒血症)

10、活动性细胞性或真菌性心内膜炎。

11、活动性病毒性肝炎。

12、狂犬病

13、眼部疾病；

(1)视网膜母细胞瘤。

(2)眼前节恶性肿瘤和原发性或继发性眼内腺癌。

(3)活动性内眼炎症、结膜炎、巩膜炎、虹膜炎、葡萄膜炎和视网膜炎。

(4)影响手术结果的先天性或获得性眼部疾病。

(5)翼状胬肉或结膜、角膜表面的疾患。

14、既往眼内或眼前节手术史：

(1) 角膜屈光手术，如pRK手术、角膜散光手术。

(2)角膜激光切除手术，

(3)眼前节手术史；如白内障手术、眼内人工晶体植入及青光眼滤过手术等

15、白血病。

16、活动性播散性淋巴瘤

17、HBsAg阳性的供体。

18、接受过尸体冻干硬脑膜移植的供体。

19、嗜人T淋巴细胞病毒感染的供体。

20、抗HDV阳性的供体。

2l、抗-HIV-1或抗-H1V-Ⅱ阳性的供体。

22、AIDS病或HIV感染的供体的高危人群

23、活动性梅毒

24、活动性巨细胞病毒感染。

上述未提及的传染性疾病

眼库角膜植片制备的操作流程

眼库角膜切取：

器械准备：器械包，内含治疗巾二张，角膜剪一把、角膜镊二把、弯盘一个、纱布、棉签若干。

 操作程序：

①1%碘氟浸泡眼球5分钟 （或1：2000庆大霉素浸泡15～20分钟，1：5000升汞浸泡15～20分钟）；

② 超净台内打开器械包；  ③ 无菌纱布环行包住眼球巩膜部；

④ 用刀片全层切开角膜后2～3mm处巩膜；

⑤ 角膜剪360°剪开，用镊子取下带巩膜环的角膜（不含色素膜组织）；

⑥ 将角膜片放入保存液内，贴上标签，盖紧；

⑦ 立即作内皮细胞检查并记录；

⑧ 放入4℃冰箱保存备用；

⑨ 处理剩下的巩膜。

供体的检查与评价

㈠ 全眼球大体检查：

1．眼球的外形是否正常（如有否前后葡萄肿）；

2．角膜是否有疤痕、划伤、水肿；

3．残留结膜及肌肉是否过多。

㈡ 裂隙灯检查：  

1．角膜上皮：是否有划伤、干燥、点状病变；

2．角膜基质：是否有水肿、疤痕；

3．角膜后弹力层：是否有皱折及皱折程度

供体质量保证：

1．严格无菌操作；

2．熟练操作过程，尽量减少内皮细胞丢失；

3．严格质量检查，对有疑问的供体角膜由眼库医生或主任决定是否可用。

供体的保存

㈠ 短期保存：

湿房保存：

⑴ 将处理好的眼球放入浸有庆大霉素-生理盐水湿纱布眼杯，角膜向上、加盖、4℃保存；

⑵ 24小时内可用；

⑶ 一般不超过36小时。

㈡ 中期保存（角膜片制备见上一节）：

Optisol液等中期角膜保存液：

⑴ 可保存半月；

⑵ 最好不超过一周；

⑶ 保存前应作好内皮细胞记录；

（三）长期保存

甘油冷冻

出库

病区责任医师开出角膜组织申领单，眼库人员出具出库单

巩膜的制备和保存：

1．取完角膜片后，用棉签将眼内容及全部色素膜捋出；

2．翻转巩膜壳，将色素膜组织刮尽；

3．70%酒精浸泡30分钟；

羊膜组织操作流程及出入库管理规定

羊膜组织入出库程序

一、 入库

1、 羊膜供体的筛选    

取前征得供体医院同意，羊膜的选材严格遵循供体医学标准：1）为避免污染，必须是顺利的剖腹产胎盘；羊膜破裂者及新生儿溶血（母子RH血型不符）可弃之不用 2）母亲的梅毒、HIV、乙肝和丙肝等传染性疾病的血清学检查结果阴性者

2、  羊膜植片制备的操作流程

胎盘和羊膜取下后立即放入无菌袋内，送往实验室或眼库进行处理：1）在无菌条件下，将胎盘置于超净工作台内，用无菌生理盐水反复冲洗血块和胎盘残渣。2）钝性分离羊膜与绒毛膜组织。将分离的羊膜用含有抗生素（50ug/ml青霉素、100ug/ml硫酸妥布霉素和25ug/ml两性霉素B）的平衡盐BBS缓冲液冲洗浸泡5～10分钟。

3、羊膜保存

取出浸泡消毒后的羊膜，按不同要求剪成2～3cm大小直接放入无菌纯甘油中置于－20摄氏度冰箱冷冻保存；或上皮面朝上贴在无菌的硝酸纤维滤膜或无菌手术滤巾置于灭菌的DMEM营养液甘油中，立即放入－80摄氏度冰箱内保存。

操作流程图          羊膜获取     

                                    ↓

                         羊膜无菌处理             

                                   ↓

                            羊膜保存  

二、 出库

1、 病区责任医师开出羊膜组织申领单，眼库人员出具出库单

2、羊膜的使用，因术式不同，术眼的准备也不尽相同。1）使用前将羊膜解冻。将羊膜从保存的甘油中取出，用含有抗生素的BBS液漂洗，上皮面朝上，盖在患眼上 2）羊膜在植床上展平，用9/0可吸收缝线或10/0尼龙线将羊膜植片的边缘与周围结膜缝合。3)术后15～20天拆线，观察手术效果。